### 产品及特点

尊龙凯时推出的一款基于探针法荧光定量PCR原理开发的检测试剂盒，具有多项显著特点：

1. 即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，即可进行检测。
2. 高灵敏度：引物及其他组分经过严格优化，确保极高的灵敏度。
3. 阳性对照：提供阳性对照，便于有效区分假阴性样品。
4. 特异性强：引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区，避免与其他生物样本的DNA发生交叉反应。
5. 多功能检测：既可用于定性也可用于定量检测，定量检测时线性范围至少覆盖5个数量级。
6. 经济实用：产品足够进行50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
7. 科研专用：本产品专为科研使用设计。

### 使用方法

为确保最佳实验效果，请遵循以下步骤：

**一、DNA提取（样本制备区）**：采用自选方法提取纯化样品DNA，尊龙凯时的试剂盒与大多数市场上核酸提取试剂盒相兼容。

**二、稀释标准曲线样品（样本制备区）**：

1. 标记六个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
2. 使用带芯枪头加入45μL DEPC-H2O（建议使用带芯枪头，确保准确性）。
3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照，充分震荡1分钟，得到1×10E7拷贝/μL的标准样品，待用。
4. 更换枪头，在6号管中加入5μL 1×10E7拷贝/μL的阳性对照，震荡1分钟，得到1×10E6拷贝/μL的标准样品，待用。
5. 依此类推，操作直到获得6个稀释度的标准样品。

如无需制作标准曲线，可将阳性对照稀释到1×10E5拷贝/μL。

**三、试剂配制（试剂准备区）**：若有N个待测样品，需准备N+2个qPCR管，向各PCR管中加入相关成分（详见说明书）。

**四、添加模板（模板添加区）**：向qPCR管中分别加入2μL模板，顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板、阳性对照，离心30秒后立即进行扩增反应。

**五、扩增反应（扩增及产物分析区）**：将PCR管放置于PCR扩增仪器中，进行预设扩增程序（详见说明书）。

**六、结果分析**：

1. 若制作标准曲线，以阳性对照浓度的log值为横轴，Ct值为纵轴，绘制标准曲线，然后根据Ct值推算样品DNA浓度的log值。
2. 若未制作标准曲线，则以下列标准判定结果：阳性对照结果Ct值<30且呈现典型S型曲线；阴性对照Ct值达到38或无Ct值；样本检测结果Ct值<35表明为阳性，若Ct值在35-38之间，应进行复检。

### 运输及保存

本产品需低温运输，保存于-20℃，有效期为一年。阳性对照需单独保存，以免污染其他试剂。

尊龙凯时致力于为科研和临床检测提供高质量的产品，助力生物医疗领域的发展。